Análises citopatológicas do vírus do enrolamento da folha da videira 3 (Grapevine leafroll-associated virus 3, GLRaV-3), gênero Vitivirus foram feitas utilizando-se tecido caloso obtido in vitro, para investigar seu uso no estudo do vírus associado ao enrolamento da folha da videira (EFV). Secções ultrafinas foram feitas a partir de cultura de calos obtidos de hastes e brotos de videiras (Vitis spp.) infetadas pelo GLRaV-3. Dois tipos de calos foram observados. Um tipo transparente composto de células grandes e altamente vacuoladas contendo uma fina camada de citoplasma. Um outro tipo, de coloração marrom, composto de um grupo de células pequenas, compactamente arranjadas, cujo citoplasma era bem mais abundante. Nestas células foram observadas, em maior aumento, massas formadas por fibras flexuosas com 10-12 nm de diâmetro, cujo aspecto corresponde ao das partículas de closterovírus em cortes de tecido. Grupos de vesículas também foram observados, com tamanhos variando entre 50-200 nm, formadas por uma única membrana e contendo material fibrilar muito fino, característico de infecções causadas por closterovírus. A concentração do vírus foi monitorada por testes de Immunosorbent electron microscopy (ISEM), os quais mostraram que a cultura de calos obtidos de videiras infetadas pôde ser usada para estudar os vírus associados ao EFV durante várias gerações, apesar da diminuição da concentração de vírus após repetidas transferências. Não foram observadas partículas de vírus em tecido caloso obtidos de videiras sadias.
The cytopathology of grapevine (Vitis spp.) callus tissue infected with Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), genus Vitivirus was studied in order to investigate the usefulness of callus cultures to study grapevine leafroll-associated viruses. Ultrathin sections were made from in vitro callus obtained from stems and shoots of GLRaV-3 infected grapevine plants. Callus was composed of two types of tissue. Translucent, soft callus was formed and composed of large loosely arranged cells, containing big vacuoles and a thin layer of cytoplasm. Other parts of the callus were brown-coloured and composed of small compactly arranged cells, which showed flexuous and rod-shaped closterovirus-like particles, with 10-12 nm in diameter, at higher magnifications. Groups of vesicles formed by a single membrane were also observed, with sizes ranging from 50-200 nm, containing fine fibrillar material, also typical of closterovirus infections. Virus concentration was monitored by Immunosorbent electron microscopy (ISEM) tests, which showed that in vitro culture of callus tissue from grapevine infected plants, could be used to study the GLRaV viruses through many successive generations, despite the decline in virus concentration after repeated transfers. No virus particles were observed in callus tissue obtained from healthy grapevines.
